Título:	Evolução molecular in vitro: seleção de moléculas inseticidas para insetos-praga do algodoeiro.
Autoria:	SILVA, M. C. M. da BRUNETTA, P. S. F. FIGUEIRA, E. L. Z. MAGALHÃES, M. T. Q. OLIVEIRA, G. R. RAMOS, H. B. SARTO, R. P. del CRUZ, C. M. OLIVEIRA, R. S. CAVALCANTI, K. L. CRAVEIRO, K. BARBOSA, A. E. A. D. PAES, N. S. ROCHA, T. L. TEIXEIRA, F. R. COUTINHO, M. V. GROSSI-DE-SÁ, M. F.
Ano de publicação:	2005
Referência:	Brasília, DF : Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, 2005.
Páginas:	22 p.
Conteúdo:	O bicudo-do-algodoeiro (Anthonomus grandis) e a lagarta do cartucho (Spodoptera frugiperda) são insetos que causam perdas significativas para a agricultura devido aos danos causados à cultura do algodão. Estratégias biotecnológicas utilizam proteínas envolvidas com a defesa de plantas, incluindo as d-endotoxinas e os inibidores de a-amilases (aAIs), como ferramentas no desenvolvimento de plantas resistentes aos insetos-praga. Neste contexto, a estratégia envolvendo a evolução in vitro de moléculas, por meio da técnica de DNA shuffling, tem sido aplicada para gerar moléculas variantes, com melhor toxicidade e especificidade para insetos-praga. Quatro bibliotecas combinatórias foram construídas utilizando as técnicas de DNA shuffling e Phage display. Três genes para toxinas Cry (cry1Ia12, cry3Aa1 e cry8Ha), assim como a recombinação dos genes aAI-1 and aAI-2, isolados de sementes de Phaseolus vulgaris, foram utilizados para a reação de DNA shuffling, gerando bibliotecas individualizadas. Cada uma das bibliotecas de variantes de aAIs e de toxinas Cry geraram cerca de 105-107 genes mutantes, que foram selecionados in vitro contra as a-amilases e BBMV intestinal (Brush Border membrane Vesicles) dos insetos, A. grandis e S. frugiperda. Os genes para moléculas variantes foram expressos na superfície de fagos e as proteínas recombinantes foram avaliadas em bioensaios. Os dados obtidos confirmam a eficiência da estratégia na geração de um grande número de moléculas variantes, com atividade e especificidade melhoradas para insetos-praga alvos.
Thesagro:	Anthonomus Grandis Spodoptera Frugiperda
NAL Thesaurus:	DNA shuffling
Palavras-chave:	Bicudo do algodoeiro Lagarta do cartucho Insetos praga Cultura do algodão Estratégias biotecnológicas Evolução in vitro Moléculas
Série:	(Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Boletim de pesquisa e desenvolvimento, 99).
Tipo do Material:	Folhetos
Acesso:	openAccess
Aparece nas coleções:	Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento (CENARGEN)