Replicação de um baculovírus recombinante contendo o gene rolA de Agrobacterium rhizogenes em cultura de células de inseto.

FERREIRA, B. C.; SIHLER, W.; CARNEIRO, M.; SOUZA, M. L. de

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Campo DC	Valor	Idioma
dc.contributor.author	FERREIRA, B. C.	pt_BR
dc.contributor.author	SIHLER, W.	pt_BR
dc.contributor.author	CARNEIRO, M.	pt_BR
dc.contributor.author	SOUZA, M. L. de	pt_BR
dc.date.accessioned	2011-04-09T13:17:39Z	-
dc.date.available	2011-04-09T13:17:39Z	-
dc.date.created	2006-07-10	pt_BR
dc.date.issued	2005	pt_BR
dc.identifier.citation	Brasília: Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, 2005.	pt_BR
dc.identifier.uri	http://www.infoteca.cnptia.embrapa.br/infoteca/handle/doc/187228	pt_BR
dc.description	As características morfológicas conferidas a plantas infectadas por Agrobacterium rhizogenes têm como principal responsável o gene rolA. Entre as anomalias causadas por esse gene estão a redução do tamanho da planta, inibição do crescimento da raiz e retardo na floração. Em trabalhos anteriores foi construído um baculovírus recombinante com o gene rolA no locus do gene da poliedrina. O gene rolA foi clonado no vetor pFastBac HTb usado para transformação em células DH10Bac cells (Invitrogen), que contêm o genoma viral de Autographa californica Nucleopolyhedrovirus (AcMNPV). Este DNA viral recombinante foi cotransfectado em células de inseto Sf9 resultando em um vírus deficiente na produção da poliedrina, o qual foi chamado de v-rolA (Sihler et al, 2002). No presente trabalho foi investigada a infecção do vírus v-rolA nas diferentes linhagens celulares de Trichoplusia ni (Tn5B1-4) e de Spodoptera frugiperda, IPLB-SF-21AE e Sf9. O inóculo viral foi removido depois de uma hora de adsorção e as células foram incubadas em meio TNMFH a 27°C por 48h. O progresso de infecção foi monitorado por microscopia óptica. Alterações morfológicas como hipertrofia nuclear e formação de corpo denso foram observados nas células Tn5B1-4, SF21 e Sf9 após 24h. O DNA do vírus recombinante foi extraído de células infectadas, digeridas com enzima Pst I e amplificado através da técnica de PCR. As amostras de DNA foram analisadas por eletroforese em gel de agarose mostrando que o vírus se replicou em todas as linhagens celulares.	pt_BR
dc.language.iso	por	pt_BR
dc.relation.ispartofseries	(Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento, 111)	pt_BR
dc.rights	openAccess	pt_BR
dc.subject	Baculovírus recombinante - replicação	pt_BR
dc.subject	Gene rolA	pt_BR
dc.subject	Agrobacterium rhizogenes	pt_BR
dc.subject	Células - inseto- cultura	pt_BR
dc.title	Replicação de um baculovírus recombinante contendo o gene rolA de Agrobacterium rhizogenes em cultura de células de inseto.	pt_BR
dc.type	Folhetos	pt_BR
dc.date.updated	2011-04-10T11:11:11Z	pt_BR
dc.format.extent2	18p.	pt_BR
riaa.ainfo.id	187228	pt_BR
riaa.ainfo.lastupdate	2007-06-06	pt_BR
Aparece nas coleções:	Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento (CENARGEN)

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