Título:	Extração de RNA total de células-alvo isoladas por microdissecção a laser.
Autoria:	SCHIETTI, R. FARIA, D. A. de AGUIAR, N. N. de ARAUJO, A. C. G. de
Afiliação:	RAFAELA SCHIETTI; DANIELLE ASSIS DE FARIA; NATHÁLIA NASCIMENTO DE AGUIAR; ANA CLAUDIA GUERRA DE ARAUJO, CENARGEN.
Ano de publicação:	2026
Referência:	Brasília, DF : Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, 2026.
Conteúdo:	Neste trabalho, apresentamos um novo protocolo para o isolamento de RNA de CG e CV de raízes de soja e amendoim infectadas ou não por Meloidogyne spp., respectivamente, utilizando a MDL. Foram identificadas etapas críticas responsáveis por grande parte da degradação e perda de RNA: (i) a infiltração e inclusão dos fragmentos radiculares a altas temperaturas (Paraplast Plus®); (ii) a microtomia das secções à temperatura ambiente; (iii) longo tempo de exposição ao laser durante a microdissecção; (iv) a pouca quantidade e baixa preservação das células-alvo microdissectadas e (v) o processo de isolamento do RNA. Para superar essas questões, foram utilizados diferentes protocolos disponíveis na literatura, ou não com modificações. Assim foi incluído o criométodo, a fixação e remoção do meio de inclusão das criosecções; a dissecção a laser foi agilizada, um número maior de células-alvo coletado e preservados em solução protetora de RNA e, finalmente, a avaliação preliminar da qualidade e concentração do RNA a cada etapa modificada, de forma célere e de baixo custo.
Thesagro:	Soja Amendoim Meloidogyne spp RNA
Série:	(Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Circular Técnica, 100).
Tipo do Material:	Folhetos
Acesso:	openAccess
Aparece nas coleções:	Circular Técnica (CENARGEN)