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Campo DCValorIdioma
dc.contributor.authorBRITO, L. G.pt_BR
dc.contributor.authorOLIVEIRA, M. C. de S.pt_BR
dc.contributor.authorMOURA, M. M. da F.pt_BR
dc.contributor.authorSILVA NETTO, F. G. da S.pt_BR
dc.contributor.authorCAVALCANTE, F. A.pt_BR
dc.contributor.authorMARIM, A. D.pt_BR
dc.contributor.authorSOUZA, G. C. R. dept_BR
dc.contributor.authorSILVA, J. L. dapt_BR
dc.date.accessioned2011-04-09T18:47:51Z-
dc.date.available2011-04-09T18:47:51Z-
dc.date.created2009-10-15pt_BR
dc.date.issued2006pt_BR
dc.identifier.citationPorto Velho: Embrapa Rondônia, 2006.pt_BR
dc.identifier.urihttp://www.infoteca.cnptia.embrapa.br/infoteca/handle/doc/710703pt_BR
dc.descriptionFoi otimizada uma metodologia de extração de DNA genômico a partir de coágulo sanguíneo. Amostras de sangue com e sem anticoagulante EDTA para a obtenção dos coágulos sanguíneos foram coletadas em bovinos nos estados de Rondônia e Acre para pesquisa de Anaplasma marginale. Para a extração de DNA a partir do coágulo sanguíneo testaram-se dois tipos de tecido de nylon: no tratamento 1, o tecido utilizado apresentava diâmetro dos poros de 200 µm e no tratamento 2, tecido com poros de diâmetro de 1.200 µm. As amostras de sangue com anticoagulante representaram o tratamento 3, sendo este considerado como tratamento controle. Após a quebra mecânica, os coágulos sofreram centrifugação a 7.000 RPM por 15 minutos passando através das malhas dos tecidos utilizados nos tratamentos 1 e 2. A extração de DNA das amostras a partir do coágulo centrifugado e do sangue total se deu através da utilização de kit comercial para extração de DNA genômico. A quantificação do DNA obtido foi realizada através de espectrofotometria a 260 e 280 m, sendo sua integridade verificada através de eletroforese em gel de agarose. As amostras de DNA obtidas a partir dos diferentes protocolos foram utilizadas como molde para amplificação, por PCR, do gen msp5 de A. marginale. A quantidade de DNA obtida pelos tratamentos 1 e 2 foi semelhante a do sangue total (33,39 ± 1,17; 31,76 ± 0,663; 32,35 ± 0,676, respectivamente). A pureza do DNA nas amostras obtidas a partir dos tratamentos 1 e 2 foram semelhantes a do sangue total (A260/280 = 1,61 ± 0,068; 1,58 ± 0,035; 1,63 ± 0,028, respectivamente). A utilização de tecidos de organza ou tipo filó se mostrou como uma metodologia apta a ser incorporada como método de rotina para extração de DNA a partir de coágulo sanguíneo bovino por ser uma metodologia simples, rápida, barata e reproduzível para a obtenção de quantidades consideráveis de DNA de boa qualidade para utilização em estudos de epidemiologia molecular em patologias bovinas.pt_BR
dc.language.isoporpt_BR
dc.relation.ispartofseries(Embrapa Rondônia. Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento, 43).pt_BR
dc.rightsopenAccesspt_BR
dc.subjectExtração de DNApt_BR
dc.subjectCoágulo sanguíneopt_BR
dc.subjectEpidemiologia molecularpt_BR
dc.subjectDoenças de bovinospt_BR
dc.subjectDNA extractionpt_BR
dc.subjectblood clotpt_BR
dc.subjectbovine diseasespt_BR
dc.titleExtração de DNA a partir de coágulos sanguíneos bovinos.pt_BR
dc.typeFolhetospt_BR
dc.date.updated2011-04-10T11:11:11Zpt_BR
dc.subject.nalthesaurusmolecular epidemiologypt_BR
dc.format.extent217 p.pt_BR
riaa.ainfo.id710703pt_BR
riaa.ainfo.lastupdate2011-01-04pt_BR
dc.contributor.institutionLuciana Gatto Brito, Embrapa Rondônia; Márcia Cristina de Sena Oliveira, Embrapa Pecuária Sudeste; Maria Manuela da Fonseca Moura, UNIR; Francelino Goulart da Silva Netto, Embrapa Rondônia; Francisco Aloísio Cavalcante, Embrapa Acre; Adriana Denise Marim.pt_BR
Aparece nas coleções:Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento (CPAF-RO)

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