Title:	Isolamento de células gigantes em galhas de raízes de leguminosas por microdissecção a laser (MDL).
Authors:	NIELEN, S. SA, M. F. G. de GUIMARAES, P. M. ARAUJO, A. C. G. de
Affiliation:	STEPHAN NIELEN MARIA FATIMA GROSSI DE SA, CENARGEN PATRICIA MESSENBERG GUIMARAES, CENARGEN ANA CLAUDIA GUERRA DE ARAUJO, CENARGEN.
Date Issued:	2023
Citation:	Brasília, DF: Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, 2023.
Description:	O desenvolvimento de novas estratégias para a produção de cultivares resistentes aos nematoides das galhas inclui o maior conhecimento de genes envolvidos no desenvolvimento de células gigantes (CG), formadoras dos sítios de alimentação, durante a infecção de plantas suscetíveis por nematoides da galha. A análise transcricional baseada em todo o tecido da raiz ou da galha formada pelo parasita resulta na identificação de numerosos genes diferencialmente expressos. Para identificar genes específicos da interação planta-nematoides formadores de galhas (NFG) e genes de suscetibilidade que possibilitam a infecção, uma abordagem promissora é estudar o transcritoma específico das CGs. Neste estudo, a técnica de microdissecção a laser foi estabelecida para isolamento de CGs produzidas por Meloidogyne spp., em formação nas raízes de leguminosas (soja e amendoim) suscetíveis. Para tal, CGs de segmentos de raízes coletados após a inoculação com Juvenis 2 (J2) e incluidos em Paraplast foram microdissectadas a laser, e utilizadas para extração do RNA, seguida da síntese de DNA complementar, e da amplificação por PCR de genes expressos constitutivamente, como indicação indireta da integridade do RNA. O detalhamento do método e fluxo de trabalho aqui descritos para microdissecção a laser de CGs e células vasculares das raízes dessas leguminosas, com subsequente isolamento de RNA, constitui uma ferramenta importante para a análise molecular detalhada durante a interação planta-patógeno.
Thesagro:	Soja Amendoim
NAL Thesaurus:	Root-knot nematodes Giant cells Soybeans Peanuts
Keywords:	Microdissecção a laser Laser microdissection Single-cell transcriptome Nematoides das galhas Transcritoma célula-específico Células gigantes
Series/Report no.:	(Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento, 379).
Type of Material:	Folhetos
Access:	openAccess
Appears in Collections:	Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento (CENARGEN)